กลุ่มผลิตภัณฑ์ที่ออกแบบมาเป็นพิเศษสำหรับซีลปฏิกิริยาอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์สูตรที่เป็นเอกลักษณ์ทำให้การเรืองแสงของสีย้อมไม่เสื่อมสภาพอีกต่อไปสารป้องกันการเรืองแสงที่ใช้กันทั่วไปคือAF1、AF2、AF3、AF4、AF87、AF100、AF200、AF300、CFM-1、ซีเอฟเอ็ม-2เดี๋ยวก่อน ซึ่งสินค้าส่วนหนึ่งประกอบด้วยเดปปี้สามารถย้อมนิวเคลียสหรือเยื่อบุได้ดีเอ็นเอการทดลอง
เกี่ยวกับ Antifluorescent ดับสารที่พบบ่อยสาม: Propyl gallate ของฟีนอลn-โพรพิล gallate (NPG),Parabenzodiamine ของ Amine Typep-Phenylenediamine (PPD),ประเภทเอมีน1,4-Diazabicyclo-ออคเทน(DABCO บริษัท) Triethylenediamine ทฤษฎีพื้นฐานของการชุบแข็งเรืองแสงคือหยดเช่นนี้: ออกซิเจนที่ละลายทั่วไปในชิ้นเนื้อเยื่อจะกลายเป็นออกซิเจนเดี่ยวเมื่อกระตุ้นสถานะออกซิเจนเดี่ยวคล้ายกับอนุมูลอิสระออกซิเจนสิ่งนี้เป็นตัวการหลักของการดับฟลูออเรสเซนต์เราเพิ่มสารต่อต้านการชุบแข็งส่วนใหญ่เป็นปฏิกิริยากับผู้ร้ายนี้กำจัดออกซิเจนเดี่ยวโดยตรง ให้ความสนใจกับการเพิ่มตัวแทนป้องกันการดับลงในแท็บเล็ตปิดผนึกมักจะในขั้นตอนแรกของการกระตุ้นเพื่อให้ปริมาณฟลูออเรสเซนต์ลดลงและยังมีความสัมพันธ์กับดีเอ็นเอประกอบกับความเสี่ยงต่อการเกิดปฏิกิริยาย้อมสี ดูข้อดีและข้อเสียของน้ํายาทั้งสามนี้เถอะPPDสามารถทำปฏิกิริยากับสีย้อมหัวกะทิ (โดยเฉพาะไซ2), ดังนั้นการปิดผนึกสีย้อมดังกล่าวพิจารณาโดยไม่ต้องมีPPDยาแนวรอยต่อ;เอ็นพีจี,ไม่เป็นพิษ,การย้อมสีเรืองแสงของเซลล์ที่มีชีวิตเป็นที่ต้องการของสารซีลประเภทนี้,อย่างไรก็ตามเอ็นพีจีแทรกแซงกระบวนการตายของเซลล์ นักเรียนที่ทําการวิจัยดังกล่าวให้ความสนใจมากขึ้นและพยายามหลีกเลี่ยงส่วนผสมของเอ็นพีจียาแนวรอยต่อ;DABCO บริษัทไม่เหมือนPPDเพื่อให้มีประสิทธิภาพและความเป็นพิษต่ำสามารถใช้ในเซลล์ที่มีชีวิตได้ แต่ด้วยเอ็นพีจีในทํานองเดียวกัน มีการแทรกแซงกระบวนการตายของเซลล์
ยาแนวรอยต่อจํานวนมากซ้อนกันที่นี่ จะหาสิ่งที่ตัวเองต้องการอย่างรวดเร็วได้อย่างไร แนวคิดง่ายๆคือ:
ขั้นแรก แบบแข็งตัวหรือไม่แข็งตัว การแข็งตัวจะเก็บและเอาไปได้สะดวกมาก สิ่งที่ต้องพิจารณาคือการหดตัวของชิ้นเนื้อเยื่อในระหว่างการแข็งตัวและการหดตัวที่ต้องมีขั้นตอนการคายน้ํา ประเภทที่ไม่แข็งตัวต้องพิจารณาคือการระเหยและการรั่วไหลด้านข้างของซีลแผ่นแน่นอนว่าต้องปิดสไลด์ (บางครั้งยังต้องการปะเก็นซีลซิลิโคนตัวแยก) และบ่อยครั้งที่ภาพนิ่งยังต้องปิดผนึก, ยาทาเล็บทั่วไป, ขี้ผึ้งทันตกรรม,VALAP (ผสมเท่ากันของวาเซลิน, ลาโนลิน, และพาราฟินผสมบนแผ่นความร้อน 60 ° C)ทาเล็บรอบ ๆ ภาพนิ่งยาทาเล็บใช้เวลานานในการแห้งและเสี่ยงต่อการปนเปื้อนของเลนส์ ขี้ผึ้งทันตกรรมสามารถรักษาได้เร็วขึ้นภายใต้อุณหภูมิปกติVALAP (ผสมเท่ากันของวาเซลิน, ลาโนลิน, และพาราฟินผสมบนแผ่นความร้อน 60 ° C)ใช้กันมากในการปิดผนึกเซลล์ที่มีชีวิต
ขั้นตอนที่ 2: ต้องใช้ glycerol (ละลายน้ำได้) หรือไม่ใช่ glycerol (ละลายในไขมัน)? กลีเซอรีนสามารถผสมกับน้ำในสัดส่วนใด ๆ และสามารถละลายกับเอทานอล แต่ไม่ผสมกับน้ำมัน รู้อย่างนี้ การเลือกมันง่ายกว่ามาก ระบบการตอบสนองแบบกลุ่มของคุณเป็นอย่างไร มีน้ำก็ให้เลือกกลุ่มกลีเซอรีน (ที่ละลายน้ำได้) หลังจากการคายน้ำอย่างเข้มงวดให้เลือกที่ไม่ใช่กลีเซอรีน (น้ำมันที่ละลายน้ำได้)
ขั้นตอนที่สามดัชนีการหักเหของแท็บเล็ต แผ่นย้อมสีด้วยตัวแทนซีลเพื่อเลือกดัชนีหักเหใน1.52ถึง1.54ความโปร่งใสที่ดีที่สุดระหว่าง; เนื้อเยื่อที่ไม่ย้อมสีจะดีกว่าที่จะปิดผนึกด้วยแคปซูลที่มีอัตราการพับสูงหรือต่ำมากซึ่งจะช่วยลดความแตกต่างทรงกลมเพื่อให้ได้ภาพที่ดีที่สุด
แนะนำตัวแทนการขึ้นรูปฟิล์ม:
แอลกอฮอล์โพลีไวนิลโพลี (ไวนิลแอลกอฮอล์): สารอินทรีย์ที่มีโมเลกุลสูงปลอดสารพิษสามารถละลายได้ในน้ำเป็นตัวแทนการขึ้นรูปฟิล์มชนิดหนึ่งที่ใช้กันทั่วไป เรียบเรียงเป็นหมายเลขที่แตกต่างกันตามระดับที่แตกต่างกันของพอลิเมอไรเซชันและความกลมกล่อมเช่นMowiol ® 4-88。PVAนอกจากนี้ยังสามารถเพิ่มสารอื่น ๆ หรือปฏิกิริยาสำหรับการประมวลผลดัดแปลงเช่นเปอร์มาฟิกซ์-1ก็คือการดัดแปลงPVA。
เอทิลีนไพโรลิโดน(โพลีไวนิล pyrrolidone)ชื่อย่อPVPมันเป็นสารประกอบพอลิเมอร์ชนิด nonionic และยังเป็นตัวแทนการขึ้นรูปฟิล์มที่ใช้กันทั่วไป
|
|
ฐานกลีเซอรีน |
ไม่ใช่กลุ่ม Glycerol |
|
ประเภทที่ไม่แข็งตัว |
AF1 CFM-1 + Antifadent
AF1 + DAPI CFM-1
AF2 ซีเอฟเอ็ม-2
AF4 เครื่อง CFMR-2
AFP1 CFM-3 |
AF3
AFR3
AF87 |
|
ประเภทการแข็งตัว |
AF200 + Tris MWL 4-88
AF300 + Tris MWL 4-88
AF200 + CFPVOH
AF300 + + CFPVOH |
PVP + Antifadent (ดัชนีหักเห 1.5)
CFPVOH + Antifadent
CFPVOH + AF100
PF + AF100 |
คู่มือการเลือกซื้อสินค้า:
ลิตร AF1:ส่วนผสมพื้นฐานคือกลีเซอรีน,PBSบัฟเฟอร์, สารป้องกันการเรืองแสง, ส่วนประกอบอื่น ๆ , ดัชนีหักเห1.46,PH10ซ้ายและขวาเหมาะสำหรับใช้ในการตรวจสอบชิ้นเนื้อเยื่อแช่ในกลีเซอรีนเซลล์ที่ตายแล้ว ปลา (รวมถึง CARD-FISH)การปิดผนึก ฯลฯ
ลิตร AF2:ส่วนประกอบพื้นฐานคือกลีเซอรีน, สารป้องกันการเรืองแสง, ส่วนประกอบอื่น ๆ และอื่น ๆ โดยไม่มีบัฟเฟอร์ของตัวเอง ดัชนีหักเห1.47ข้อดีของผลิตภัณฑ์นี้คือไม่มีบัฟเฟอร์ของตัวเองและสามารถเข้ากันได้กับบัฟเฟอร์อื่น ๆ
ลิตร AF3:ส่วนผสมพื้นฐานคือPBSบัฟเฟอร์, สารป้องกันการเรืองแสง, ส่วนประกอบอื่น ๆ , ดัชนีหักเห1.34,สำหรับการตรวจหาเซลล์ที่มีชีวิตมีความเหมาะสมเป็นพิเศษ
ลิตร AFR3:ส่วนผสมพื้นฐานคือPBSบัฟเฟอร์, สารป้องกันการเรืองแสงชนิดใหม่ล่าสุด (nonamine nonphenolic type), ส่วนประกอบอื่น ๆ เป็นต้น
ลิตร AF4:เรียกอีกอย่างว่าสื่อติดตั้ง Glycerol / n-propyl gallateสารซีล, สารป้องกันการเรืองแสงที่เพิ่มเป็น Propyl gallaten-โพรพิล gallate (NPG)。
ลิตร AF87: สถานที่พิเศษคือมีน้ำมันที่แช่โดยไม่ต้องเรืองแสงซึ่งออกแบบมาเป็นพิเศษสำหรับการสังเกตการณ์ภายใต้กระจกกำลังสูงสำหรับDAPIการย้อมสีมีประโยชน์อย่างยิ่ง (DAPIมีแนวโน้มที่จะอพยพในยาเม็ด Glycerol Seal)
ลิตร AF100:ส่วนผสมพื้นฐานคือPBSบัฟเฟอร์, สารป้องกันการเรืองแสง, ส่วนผสมอื่น ๆ และอื่น ๆ ซึ่งเป็นซีลที่ไม่มีกลีเซอรีนซึ่งต้องใช้ร่วมกับCFPVOHโซลูชันจับคู่ ต้องผสมก่อนAF100และCFPVOHวิธีการแก้ปัญหาเท่าไหร่ผสมกับเท่าใดหลังจากผสม10หมดภายใน 1 ชั่วโมง ดัชนีการหักเหของแคปซูลนี้1.34-1.35.
ลิตร AF200:ด้วยAF100ทำนองเดียวกัน ความแตกต่างคือAF200เป็นฐาน glycerol,Amino-based anti-fluorescent decessant เหมาะสำหรับ anthocyanins, Alexa, Hoeches และซีลอื่น ๆ
ลิตร AF300:ด้วยAF100ทำนองเดียวกัน ความแตกต่างคือAF300เป็นกลีเซอรอลชนิดฟีนอลชนิดป้องกันการเรืองแสง
ลิตร CFMดัชนีการหักเหของแคปซูลของซีรี่ส์มีทั้งหมด1.52,เท่ากับหรือประมาณเท่ากับดัชนีหักเหของแผ่นพาหะและกระจกฝาที่ใช้ ซึ่งเป็นประโยชน์ต่อการได้มาซึ่งภาพที่สมบูรณ์แบบ ส่วนใหญ่ใช้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์เลเซอร์ร่วมโฟกัสหรือแทนที่การแช่น้ำมันในกรณีที่กระจกกำลังสูงจำเป็นต้องแช่น้ำมันCFM-1ของpHประมาณ6.5,CFM-1 บวก Antifadentของพีเอชมูลค่าโดยประมาณ10,ซีเอฟเอ็ม-2ของpH ของประมาณ~8.5,CFM-3ของพีเอชมีค่าใกล้เคียงกับความเป็นกลาง
ข้อมูลการสั่งซื้อ:
|
หมายเลขสินค้า |
ชื่อผลิตภัณฑ์ |
ข้อกำหนด |
|
17970-25 |
ซิติฟลูออร์ ™ AF1 |
25 มิลลิตร |
|
17970-125 |
ซิติฟลูออร์ ™ AF1 + DAPI |
15 มิลลิตร |
|
17971-25 |
ซิติฟลูออร์ ™ AF2 |
25 มิลลิตร |
|
17972-25 |
ซิติฟลูออร์ ™ AF3 |
25 มิลลิตร |
|
17973-10 |
ซิติฟลูออร์ AFR3 |
10 มิลลิตร |
|
17973-25 |
ซิติฟลูออร์ ™ AF4 |
25 มิลลิตร |
|
17976-10 |
ซิติฟลูออร์ ™ AF87 |
10 มิลลิตร |
|
17977-10 |
ซิติฟลูออร์ ™ AF200 |
10 มิลลิตร |
|
17977-25 |
ซิติฟลูออร์ ™ AF300 |
10 มิลลิตร |
|
17977-50 |
ซิติฟลูออร์ ™ PVP-1 |
25 มิลลิตร |
|
17977-100 |
ซิติฟลูออร์ ™ PVP-1 + สารป้องกันการฟ้า |
25 มิลลิตร |
|
17977-150 |
ซิติฟลูออร์™ MWL4-88 |
25 มิลลิตร |
|
17978-35 |
ชุด Citifluor™ CFPVOH และ AF100 |
25 มิลลิตร + 5 มิลลิตร |
|
17980-10 |
ซิติฟลูออร์ CFM-1 |
10 มิลลิตร |
|
17981-10 |
ซิติฟลูออร์ CFM-1 |
10 มิลลิตร |
|
17982-10 |
ซิติฟลูออร์ CFM-2 |
10 มิลลิตร |
|
17979-10 |
ซิติฟลูออร์ CFMR-2 |
10 มิลลิตร |
|
17979-20 |
ซิติฟลูออร์ CFM-3 |
10 มิลลิตร |
|
17979-50 |
ซิติฟลูออร์ ™ PF |
10 มิลลิตร |
